Annexes de rapport d'évaluation préalable finale

7 en 2007,

14 échantillons combinés en 1999

7

14

0,08 +/- 0,02 ng/mL

0,09 +/- 0,03 ng/mL

Limite de dosage : 0,0004 ng/g de plasma

DL50par voie orale (rat) supérieur(e) à  50 000 mg/kg p.c. (International Bio-Research Inc., 1967).
DL50 par voie orale (souris) = 3 200 mg/kg (Gustafsson et Wallen, 1988).

CL₅₀ par inhalation (rat) supérieur(e) à  10 920 mg/m³ après 4 heures (Velsicol Chemical Corporation, 1978e) [réduction de l'activité motrice, strabisme, légère dyspnée et érythèmes].
CL₅₀ par inhalation (souris) supérieur(e) à  50 mg/L (50 000 mg/m³) après 8 heures, aucun signe de toxicité (Great Lakes Chemical Corp, 1967a).

DL50 par voie cutanée (lapin) supérieur(e) à  10 000 mg/kg p.c. (Hill Top Research Inc., 1966).

DL50 par voie orale (rat) supérieur(e) à  5 000 mg/kg p.c. (Abbott et al., 1981).

DL50 par voie cutanée (lapin) supérieur(e) à  2 000 mg/kg (Abbott et al., 1981). Érythème et œdèmes légers à modérés. Avec le temps, la gravité de la réaction cutanée s'atténuait et la région touchée diminuait. Aucun signe pathologique macroscopique n'a été observé.

DL50par voie orale (rat) supérieur(e) à  5 000 mg/kg p.c. (Goldenthal and Dean, 1974a).

CL₅₀ par inhalation (rat) supérieur(e) à  12,5 mg/L (12 500 mg/m³) [Goldenthal et Dean, 1974a].

DL50 par voie cutanée (lapin) supérieur(e) à  2 000 mg/kg (Goldenthal et Dean, 1974a).

DMENO la plus faible, par voie orale = 700 mg/kg p.c. par jour d'après une légère hypertrophie des hépatocytes, une infiltration cellulaire inflammatoire et une nécrose focale des hépatocytes à cette dose et à des doses plus fortes (Tada et al., 2007).  Des souris ICR mâles ont été exposées par gavage à des doses de TBBPA de 0, 350, 700 et 1 400 mg/kg p.c. par jour pendant 14 jours. Une augmentation importante du poids absolu et relatif du foie a été observée à la dose la plus élevée.

Autre DSENO par voie orale (rats, 28 jours) = 250 mg/kg p.c. par jour. Une étude sur des rats Wistar exposés par gavage n'a montré aucun effet sur le foie (Szymanska et al., 2000).

Le RER de l'UE (2006) indique que la plupart des quelques études de toxicité à doses répétées administrées par voie orale avaient une portée limitée ou étaient peu détaillées (IRDC, 1972; Sato et al., 1996; Szymanska, 1995; Frydrych et Szymanska, 2001). Selon des études plus récentes menées par Germer et al. (2006), aucun effet sur les microsomes ou l'ARNm hépatique des rats Wister exposés à des concentrations alimentaires équivalant à 0, 30, 100 et 300 mg/kg p.c. par jour pendant 28 jours.

CMENO la plus faible par inhalation (rats, 14 jours) = 18 000 mg/m³ d'après l'observation d'une irritation locale dans les voies respiratoires supérieures (IRDC, 1975). Aucun effet toxicologique important n'a été observé (IRDC, 1975).

DSENO la plus faible par voie cutanée (lapins, 3 semaines) = 2 500 mg/kg p.c. par jour. Aucun effet nocif n'a été observé (IRDC, 1979).

DSENO la plus faible par voie orale (rats, 90 jours) = 100 mg/kg p.c. par jour (The Dow Chemical Company, 1975). Aucune lésion macroscopique ou histopathologique n’a été observée chez les rats exposés à 0, 0,3, 3, 30 ou 100 mg/kg p.c. par jour dans leur alimentation pendant 90 jours.

Autre DSENO par voie orale (rats, 90 jours) = 1 000 mg/kg p.c. par jour (MPI Research, 2002a). Dans le cadre d'une étude de toxicité par gavage de 13 semaines, des rats ont été exposés à 0, 100, 300 ou 1 000 mg/kg p.c. par jour. Aucun effet n'a été observé dans la batterie d'observations fonctionnelles ni pendant les tests de l'activité motrice, et aucun changement histopathologique indésirable n'a été constaté dans le foie, la thyroïde, la parathyroïde ou l'hypophyse. De plus, aucune modification du taux sérique de T3 ou de TSH n'a été notée. Même si on a observé une diminution importante des taux de T4 chez les deux sexes, on n'a observé aucun autre effet lié à la thyroïde, de sorte que cette diminution n'a pas été jugée comme un effet indésirable.

Résultats négatifs : Chez S.typhimurium (souches TA1535, TA1537, TA1538, TA92, TA98 et TA100) à des concentrations de 0 à 10 000 μg/plaque avec ou sans activation métabolique (Litton Bionetics Inc., 1976; Velsicol Chemical Corporation, 1978a; Israel Institute for Biological Research, 1978; Ethyl Corporation, 1981; The Dow Chemical Company, 1985; Mortelmans et al., 1986; Great Lakes Chemical Corporation, 1986).

Résultats négatifs : Dans les souches D3 et D4 de levure (Saccharomyces cerevisiae) à des concentrations de TBBPA allant de 0 à 500 μg/plaque avec ou sans activation métabolique (Velsicol Chemical Corporation, 1978a; The Dow Chemical Company, 1985).

DME(N)O la plus faible par voie orale (souris) = 140,5 à 379,9 mg/kg p.c. par jour, d'après une hypertrophie des hépatocytes, une très légère nécrose focale des hépatocytes et une diminution des concentrations de triglycéride sérique (données quantitatives non présentées) chez la progéniture femelle à cette dose (Tada et al., 2006). Il y a eu également une augmentation du taux de cholestérol sérique total (données quantitatives non présentées) chez la progéniture mâle à cette dose. Des souris ICR gravides ont été nourries avec des aliments contenant 0 %, 0,01 %, 0,1 % ou 1,0 % de TBBPA (0, 15,7 à 42,1, 140,5 à 379,9 ou 1 639,7 à 4 155,9 mg/kg p.c.) à partir du début de la gestation jusqu'au sevrage, soit au 27e jour après la naissance. On a observé une modification des concentrations sériques de cholestérol total et de triglycérides chez les mères et la progéniture. Aucun effet n'a été constaté sur la taille des portées, le poids des portées, le nombre total de descendants mâles et femelles ou le poids de la progéniture.

Doses repères minimales = 0,5 mg/kg p.c. par jour pour l'augmentation du poids des testicules des rats de la génération F1 (dose avec effet critique de 1,4 mg/kg p.c. par jour) et l'augmentation du poids de l'hypophyse des rats mâles de la génération F1 (dose avec effet critique de 2,2 mg/kg p.c. par jour; dose repère de 0,6 mg/kg p.c. par jour). Des rats Wistar ont reçu du TBBPA dans leur alimentation équivalant à 0, 3, 10, 30, 100, 300, 1 000 et 3 000 mg/kg p.c. par jour pendant 70 jours (mâles) ou 14 jours (femelles) avant l'accouplement, de même que pendant les périodes d'accouplement, de gestation et de lactation (van der Ven et al., 2008; Lilienthal et al., 2008). Aucun effet sur les paramètres de la reproduction n'a été constaté.  Des effets sur les potentiels évoqués auditifs du tronc cérébral ainsi qu'un retard du développement sexuel chez les femelles ont été observés.  Aucun changement histopathologique lié à l'exposition n'a été observé dans les organes des animaux de la génération F1.   Aucun changement histopathologique lié à l'exposition n'a été observé dans les organes des animaux de la génération F1. Aucun effet n'a été noté sur la morphologie des spermatozoïdes et le nombre de spermatozoïdes. On n’a constaté aucun effet sur la réponse immunitaire contre les hématies du mouton chez les mâles F1. Un autre « effet majeur » était l'augmentation de la latence auditive à de basses fréquences induite pendant le développement, les doses repères étant de 7,8 mg/kg p.c. et de 8,4 mg/kg p.c. par jour pour les mâles et les femelles, respectivement. Il convient de noter que des préoccupations ont été publiées concernant la métodologie employée dans le cadre de cette étude (Banasik et al., 2009; Strain et al., 2009; Lilienthal et al., 2009; van der Ven et al., 2009). Une étude avait été menée antérieurement sur des rats Wistar auxquels on a administré du TBBPA dans l'alimentation à des doses de 0, 30, 100 et 300 mg/kg p.c. par jour pendant 28 jours. Les seuls effets observés étaient une diminution des taux de T4 circulant et une augmentation des taux de T3 chez les rats mâles.

DMENO la plus faible par voie orale (rats) = 200 mg/kg p.c. par jour, d'après des lésions polykystiques associées à la dilatation des tubules des reins chez 2 des 6 mâles observées à cette dose (Fukuda et al., 2004). On a exposé des rats nouveau-nés par gavage à des doses de 0, 40, 200 et 600 mg/kg p.c. par jour à partir du 4e jour après leur naissance jusqu'à leur 21e jour de vie. Des effets sur les reins ont été observés aux deux doses les plus élevées. Quelques mâles et femelles exposés à des doses de 200 et 600 mg/kg p.c. ont souffert de diarrhée. Dans le cadre de la même étude, des rats de cinq semaines ont été exposés à des doses de 0, 2 000 et 6 000 mg/kg p.c. par jour pendant 18 jours. Aucun effet histopathologique rénal semblable n'a été observé. Le RER de l'UE (2006) a choisi la DSENO de 40 mg/kg p.c. par jour pour les besoins de la caractérisation des risques. Toutefois, on considère que l’effet sur les reins est le résultat « d'une administration directe inhabituelle par gavage de doses très élevées de TBBPA à des animaux d'un si jeune âge et d'un métabolisme ou des reins immatures. Par conséquent, la pertinence de cette constatation isolée pour la santé humaine est considérée comme douteuse. »

Autre DMEO par voie orale = 100 mg/kg p.c. par jour d'après une diminution des taux sériques de T4 chez la progéniture F0 et F1 à cette dose et à des doses plus élevées (MPI Research, 2002b et 2003). Des rats Sprague Dawley ont été exposés par gavage à des doses de 0, 100, 200 ou 1 000 mg/kg p.c. par jour pendant 10 semaines avant l'accouplement ainsi que pendant les périodes d'accouplement de 2 semaines chez les femelles, de gestation et de lactation. Les taux sériques de T3 étaient largement plus faibles chez les mâles du groupe recevant une dose de 1 000 mg/kg p.c. Aucun effet n'a été observé chez les ratons F1 et F2 en ce qui concerne le poids corporel, les résultats cliniques, le rapport des sexes, la survie pendant le sevrage, les observations macroscopiques et le poids des organes. Il a été conclu que les effets notés sur les concentrations de T3 et de T4 n'étaient pas importants sur le plan toxicologique, car les effets sur les autres paramètres étaient peu importants (MPI Research, 2002b et 2003).

Autre DMEO par voie orale = 818,9 à 2 129,2 mg/kg p.c. par jour, d'après une diminution de poids relatif de l'utérus chez la progéniture femme à la 11e semaine après la naissance à cette dose (Saegusa et al., 2009). Aucun autre changement histopathologique n'a été observé dans l'utérus et les autres organes examinés. Des rates Sprague-Dawley gravides ont été exposées du 10e jour de gestation au 20e jour suivant la mise bas (sevrage) à des concentrations alimentaires de 0, 100 ppm (9,5 à 22,9 mg/kg p.c. par jour), 1 000 ppm (86,8 à 202,1 mg/kg p.c. par jour) ou 10 000 ppm (818,9 à 2 129,2 mg/kg p.c. par jour). Le TBBPA n'a pas modifié le développement normal du cerveau. Le poids relatif des reins a diminué de façon importante à des doses de 1 000 ppm, mais pas à des doses plus élevées chez la progéniture femelle. On n'a observé aucun effet important lié à la dose sur les taux de T3, de T4 ou de TSH. Aucun effet n'a été constaté sur le nombre de sites d'implantation, le nombre de ratons vivants ou le rapport des sexes (Saegusa et al., 2009).

Une étude d'exposition pendant la période prépubère examinait les effets du TBBPA sur la sensibilité aux tumeurs de la glande thyroïde provoquées par une exposition accrue au DHPN ou au DMBA chez 344 rats Fisher. Bien que les résultats d'un scénario d'exposition complexe ne soient pas pris en compte dans l'évaluation du TBBPA seul, l'administration initiale de TBBPA 1 % (1 249 mg/kg p.c.) à des mères suivant la mise bas jusqu'au sevrage (3 semaines) entraînait une augmentation statistiquement significative du poids de la thyroïde et une diminution du poids relatifs du foie (Imai et al., 2009). Toutefois, aucun changement histopathologique n'a été observé dans le foie, et seulement une mère sur les six présentait une hyperplasie diffuse des cellules folliculaires de la glande thyroïde.

Aucun effet sur le développement ou le développement neurologique n'a été observé dans différentes études à des doses atteignant 10 000 mg/kg p.c. par jour et 1 000 mg/kg p.c. par jour, respectivement (Velsicol Chemical Corporation, 1978c; Noda et al., 1985; Eriksson et al., 1998 et 2001; MPI Research, 2001, 2002b et 2003; Hass et al., 2003).

DMEO aiguë par voie orale = 11,5 mg/kg p.c. en se fondant sur une baisse des sites de fixation de la cytisine du ligand nicotinique dans le cortex frontal, mais pas dans le cortex pariétal ni dans l'hippocampe des souris mâles néonates.

Les souris NMRI mâles (n = 6 à 8) ont reçu 11,5 mg de TBBPA/kg p.c. (21 µmol) ou une teneur de 20 % dans un excipient d'émulsion gras/kg p.c. au 10e jour après la naissance par l'intermédiaire d'un tube gastrique métallique, en une seule dose administrée par voie orale. Les animaux ont été tués 7 jours après le traitement et les niveaux de protéines de CaMKII, de GAP-43, de synaptophysine et de tau dans l'hippocampe et dans le cortex ont été mesurés à l'aide d'une analyse slot-blot. La fixation du [³H]-QNB (tous les sous-types de récepteurs muscariniques), la fixation du [³H]-AFDX 384 (récepteurs muscariniques M2/M4) et la fixation du [³H]-cytisine (récepteurs nicotiniques α4β2) ont été évaluées dans l'hippocampe, ainsi que dans le cortex pariétal et frontal. Une évaluation statistique a été effectuée par l'intermédiaire d'une analyse de la variance unidirectionnelle et d'essais par paires à l'aide du test post hoc de Newman–Keul. Apparemment, le TBBPA n'avait aucune répercussion sur les niveaux de protéines impliqués dans la maturation du cerveau, dans la croissance des neurones ou dans la synaptogénèse chez les souris néonates. On a néanmoins constaté une baisse des sites de fixation de la cytisine du ligand nicotinique dans le cortex frontal (35,9 ± 10,4 pmol/g de protéines contre 47,2 ± 7,7 pmol/g de protéines dans les témoins), mais pas dans le cortex pariétal, ni dans l'hippocampe (Viberg et Eriksson, 2011).

DMEO par voie orale = 86,8 à 202,1 mg/kg p.c. par jour sur la base d'une augmentation transitoire des interneurones d'expression de la reelin dans le hilus dentelé à cette dose et au-dessus chez les rejetons 20 jours après la naissance, mais pas 77 jours après.

Des rats Sprague–Dawley gravides (n = 8/groupe) ont été exposés à 0, 100, 1 000 ou 10 000 ppm (0, 9,5 à 22,9, 86,8 à 202,1, 818,9 à 2129,2 mg/kg p.c. par jour) de TBBPA dans le régime alimentaire du 10e jour de gestation au 20e jour après la naissance (77e jour après la naissance). Aucun changement important lié au traitement n'a été observé chez les mères pendant la gestation et la lactation. On n'a constaté aucun changement lié à la dose dans les taux sériques thyroïdiens (voir ci-dessus la section portant sur la reproduction et le développement; Saegusa et al., 2009), ni aucun effet sur l'évolution du rapport entre le poids de l'organe et le poids corporel dans le cerveau ou la thyroïde des rejetons. Une légère augmentation des corps apoptotiques chez les rejetons (n ~ 20/sexe/groupe) a été observée à une dose comprise entre 818,9 et 2 129,2 mg/kg p.c. par jour 20 jours après la naissance, mais cet effet semblait réversible, car les corps apoptotiques étaient très peu nombreux 77 jours après la naissance. Une augmentation des interneurones d'expression de la reeling dans le hilus dentelé a été observée à des doses moyennes à élevées de TBBPA, mais, encore une fois, ces effets sont repassés en dessous des niveaux témoins 77 jours après la naissance. Le nombre de neurones matures était excessif dans le hilus un peu plus tard, mais ces effets étaient réversibles. Aucune modification n'a été observée en ce qui concerne le nombre de cellules GAD67- immunoréactives dans les groupes des doses les plus élevées par rapport aux témoins non traités 20 jours et 77 jours après la naissance; de même les cellules immunoréactives EphA5 et Tacr3 dans la région CA1 de l'hippocampe n'ont pas subi de modification (Saegusa et al., 2012).

Des changements comportementaux ont été observés chez les deux groupes de souris mâles exposés par gavage aux plus faibles doses, soit 0, 0,1, 5 et 250 mg/kg p.c., mais ils n'ont pas été considérés comme liés au traitement. Il convient de noter que les auteurs ont proposé qu'un mécanisme de compensation pouvait expliquer l'absence de relation dose-réponse (Nakajima et al., 2009).

Cytotoxicité : Le TBBPA semblait cytotoxique à faible concentration micromolaire (CL₅₀ = 15 ± 4 µM) sur les cellules de neuroblastome humain SH-SY5Y, en revanche, les auteurs ont indiqué que cette étude restait floue concernant l'éventuelle neurotoxicité du TBBPA (Al-Mousa et Michelangeli, 2012). Le TBBPA entraînait l'activation des caspases (3/7) après l'exposition des cellules au TBBPA pendant 12 heures dans une gamme de concentration comprise entre 1 et 5 µM. On a également observé une augmentation temporaire des niveaux intracellulaires [Ca²⁺] et des espèces réactives de l'oxygène au sein de ces cellules neuronales. En outre, le TBBPA a également entraîné une dépolarisation des mitochondries et une libération de cytochrome c dans ces cellules neuronales (à 10 µM). L'application de 3 et de 10 µM de TBBPA pendant 12 heures a entraîné une augmentation du traitement du peptide b-amyloïde (Ab-42) et sa libération par ces cellules après quelques heures d'exposition (Al-Mousa et Michelangeli, 2012).

On a également découvert que le TBBPA était extrêmement cytotoxique dans les cultures primaires de cellules granulaires cérébelleuses après une exposition de 30 minutes à des concentrations de TBBPA comprises entre 10 et 50 µM (résultats significatifs à 25 uM). D'après les auteurs, le TBBPA a également entraîné une augmentation des concentrations intracellulaires de Ca²⁺, une dépolarisation des mitochondries et une activation de la production d'espèces réactives de l'oxygène (Zieminska et al., 2012).

Kitamura et al. (2005b) ont exposé des souris B6C3F1 ovariectomisées par injection intrapéritonéale de TBBPA à des doses de 0, 20, 100, 300 et 500 mg/kg p.c. pendant 3 jours. Bien que le rapport entre le poids de l'utérus et le poids corporel ait augmenté de façon importante chez tous les groupes exposés, la relation dose-réponse était faible.

Autre DMEO par voie orale : 150 mg/kg p.c. par jour sur la base d'une diminution de l'activation transcriptionnelle indépendante du T3 des gènes promoteurs Trh et Mc4r dans l'hypothalamus des rejetons le 2e jour après la naissance (n  supérieur(e) à 10/groupe). Des souris sauvages gravides venant de Suisse (n  supérieur(e) à 10/groupe) ont reçu 150 mg/kg p.c. de TBBPA quotidiennement par gavage oral pendant 7 jours à partir du 13e jour après la conception. L'activité des promoteurs Trh et Mc4r a été mesurée dans l'hypothalamus des ratons dans le cadre d'une étude à l'aide d'un gène rapporteur et le TBBPA a réduit de façon significative (P  inférieur(e) à 0,001) la transcription indépendante du T3 à partir des constructions rapporteurs Mc4r et Trh chez les ratons. Lorsque les ratons ont reçu du TBBPA en doses aiguës avec une ou deux injections de 2,1 g/kg de TBBPA, l'effet inverse a été observé sur l'activité transcriptionnelle indépendante du T3 des deux gènes promoteurs. Dans le cadre du premier protocole, une injection unique 48 heures avant l'euthanasie a fait baisser la transcription de Mc4r et de Trh en l'absence de T3 de 32,4 % et 33,6 %, respectivement. À l'inverse, l'administration des injections de TBBPA 48 et 24 heures avant l'euthanasie a augmenté de façon significative la transcription des deux gènes promoteurs : 28,7 % et 37,5 % pour les constructions Mc4r et Trh, respectivement (Decherf et al., 2010).

Autre DSEO par voie orale : 1 000 mg/kg p.c. par jour en se fondant sur l'absence d'évolution du poids utérin des souris femelles adultes. Du TBBPA a été administré quotidiennement par gavage oral et injection sous-cutanée pendant 7 jours à des souris femelles C57BL/6J adultes et ovariectomisées (n = 6) conformément à la ligne directrice 440 de l'OCDE. Afin de détecter une activité agoniste, des témoins, quatre doses avec un rapport de demi-log et l'EE en tant que témoin positif, ont été testés. Pour une activité antagoniste, un témoin et les 4 mêmes doses ont été administrés avec une dose de référence d'EE. La DMEO a été définie comme la dose la plus faible ayant entraîné des modifications importantes du poids de l'utérus. Cette étude a donné des résultats négatifs pour le TBBPA concernant les réponses œstrogéniques agonistes et antagonistes par les deux voies d'exposition en utilisant des concentrations pouvant atteindre 1 000 mg/kg p.c. par jour (Ohta et al., 2012).

Fort antagoniste du RP et faible agoniste du REα : Li et al. (2010) ont mesuré la transcription de la β-galactosidase médiée par le récepteur d’œstrogènes (RE) et le récepteur de progestérone (RP) in vitro dans des levures à gènes rapporteurs. Le TBBPA pouvait également renverser l'inhibition des récepteurs orphelins associés aux récepteurs des estrogènes induite par la 4-hydrooxytamoxifen. Des souches de levure ont été exposées à des concentrations de plus en plus fortes de TBBPA (1 x 10^-9 à 1 x 10^-4 mol/L) pendant 2 heures.
L'activité œstrogénique du TBBPA était manifeste dans le cadre d'un essai sur un gène rapporteur de la luciférase dans des cellules de cancer du sein MCF-7 à des concentrations allant de 1 x 10^-6 à 1 x 10^-4 M. L'effet antiandrogène a également été mesuré dans le cadre d'un système d'étude E2 dans des cellules MCF-7 à une concentration de 1 x 10^-5 M (Kitamura et al., 2005b).

Résultats négatifs – Antagoniste du RP et agoniste du RE : Aucune activité antiprogestagène ou agoniste du RE détectable n'a été mesurée à l'aide d'essais ER et PR-CALUX menés sur des cellules humaines de cancer du sein (RE) et des ostéoblastes humaines à des concentrations de 10 et 12,5 µM, respectivement (Hamers et al., 2006). Aucune activité agoniste/antagoniste du RE n'a été détectée par Riu et al. (2011) à l'aide des lignées cellulaires de gènes rapporteurs HGELN, HGELN­ERα, HGELN-ERβ (10^-9 à 10^-5 M).
Aucun effet n'a été observé sur la croissance des cellules dans un test de E-SCREEN portant sur des cellules MCF-7 du cancer du sein, même à la concentration maximale de 20 µM; le TBBPA n'a pas entraîné l'expression du gène TFFl entraînée par les récepteurs œstrogéniques in vitro (Dorosh et al., 2010).
Le TBBPA n'a montré aucune activité œstrogénique au niveau du ligand du récepteur œstrogénique alpha (ERα) à des concentrations comprises entre 10^-10 et 10^-5 M dans le cadre d'une étude d'activation transcriptionnelle par transfection stable conforme aux lignes directrices de l'OCDE (Lee et al., 2012).

Résultats positifs – Inhibiteur de la sulfatation du 17 ß-estradiol : Hamers et al. (2006) ont signalé que le TBBPA était un inhibiteur puissant de la sulfatation du 17 ß-estradiol (CI = 0,016 µM) dans un essai E2SULT.

Résultats positifs – Concurrence au T4 aux fins de fixation à la transthyrétine : Le TBBPA faisait une forte concurrence au T4 aux fins de liaison avec la transthyrétine dans le cadre d'un essai sur la fixation à la transthyrétine (CI₅₀  inférieur(e) à  0,1 µM), présentant une puissance de liaison avec la transthyrétine 1,6 fois supérieur au ligand naturel T4 (Hamers et al., 2006).

Conflit agoniste/antagoniste au niveau de l'hormone thyroïdienne :
Une augmentation de l'activité de libération de l'hormone de croissance a été observée depuis les cellules GH3 après ajout de TBBPA à des concentrations allant de 1 x 10^-6 à 1 x 10^-4 M (Kitamura et al., 2005b). Aucune activité antagoniste n'a été mesurée. D'autres travaux portant sur des cellules GH3 (GH3.TRE-Luc) montrent que le TBBPA agit comme un très faible agoniste (5 % de T3-max) à des concentrations allant jusqu'à 1 µM, mais comme un antagoniste à des concentrations supérieures à 5 µM en présence de 0,25 nM de T3 après une exposition de 24 heures seulement (Freitas et al., 2010).

L'administration de 25 µM de TBBPA a supprimé de façon significative l'activité du TRβ (CI₅₀ de 2,95 x 10^-5 M). Les auteurs ont élaboré une étude sur le gène rapporteur médiée par le TRβ-1 en utilisant une transfection provisoire des récepteurs des hormones thyroïdiennes (TR) fusionnées au Gal4 exprimant le vecteur et la structure de réponse pUAS-tk-luc du Gal4 dans les cellules HepG2 (1, 10, 25, 50 et 100 µM). Traité de façon isolée, le TBBPA n'a pas été en mesure d'entraîner l'expression de la luciférase, ce qui indique qu'il n'est pas en mesure d'activer le TR (Sun et al., 2009).

Une autre étude portant sur le gène rapporteur fondée sur la luciférase sensible aux hormones thyroïdiennes utilisant la lignée cellulaire humaine de l'hépatocarcinome HepG2 a montré que le TBBPA montrait des effets agonistes à 10 µM, mais était antagoniste en cas de coïncubation avec du T3 à 1 µM (concentrations allant de 10^-4 à 10 µM pendant 24 h; Hofman et al. 2009).

Le TBBPA associé au TRα-LBD humain, activait la transcription lorsqu'il était appliqué seul (sans T3) à 3 et 10 µM. En outre, le TBBPA a déplacé les concentrations physiologiques de T3 provenant de la fixation du TRα aux cellules HeLA à l'aide d'un système de rapporteur fondé sur la fusion du domaine de fixation du ligand à partir du TRα à un domaine de fixation à l'ADN GAL4, à une concentration de 10 µM (Fini et al., 2012).

Le TBBPA empêchait la fixation (ou entraînait la dissociation) du NcoRp, mais ne favorisait pas la fixation du SRC2p, voire inhibait la fixation du SRC2p entraînée par le T3 dans un essai de fixation de peptides coactivateur/corépresseur. Des concentrations croissantes (de 2 à 50 µM) de TBBPA étaient incubées avec du GST-LBD et un peptide corépresseur intitulé FITC (NcoRp) ou un peptide coactivateur (SRC2p) en présence et en l'absence de T3 (sans cellules) (Lévy-Bimbot et al., 2012).

À des concentrations pouvant atteindre 10 µM, le TBBPA n'a eu de répercussions sur les activités transcriptionnelles du TRα et du TRβ dans aucune des espèces étudiées (trois espèces de grenouille : Xenopus laevis, Silurana tropicalis et Rana rugosa; un poisson : Oryzias latipes; un alligator : Alligatormississippiensis; et l'espèce humaine : Homo sapiens). Afin d'examiner si l'activité stimulée par le T3 était inhibée par le TBBPA, du T3 a été ajoutée à une concentration générant une valeur de CE₅₀ pour chaque type de récepteur (TRα : 4 x 10–10 M et TRb : 2 x 10–9 M). Les résultats ont indiqué que le TBBPA inhibe l'activation du TRα et du TRβ stimulée par le T3 dans les cellules S. tropicalis etles cellules humaines à des concentrations supérieures à 10 µM (néanmoins, la viabilité des cellules après le traitement au TBBPA était compromise à des doses supérieures à 10 µM). Par conséquent, le TBBPA peut être évaluée à cette concentration ou à une concentration inférieure dans cette étude, qui n'a montré aucun effet sur l'activité des cellules humaines in vitro. En utilisant cette approche, les auteurs se sont aperçus que la transactivité du TRα O. latipes entraînée par le T3 était inhibée par le TBBPA à une concentration de 10 µM, mais que ce composé à cette concentration n'entraînait pas d'antagonisation de l'activité du TRβ (Oka et al., 2012).

Inhibition de l'activité déiodinase : Une inhibition quasi complète de l'activité de déiodinase a été observée à la dose la plus élevée testée (2,1 µM) pour le TBBPA. Une relation dose-réponse a été détectée pour le TBBPA concernant l'inhibition de la formation de rT3 à partir de T4. L'inhibition de la formation de 3,3’-T2 a également été observée à 1,9 µM. Le processus de déiodination de la thyroxine (T4) et de la triiodothyronine inverse (rT3) a été mesuré en procédant à l'incubation de microsomes hépathiques humains rassemblés avec des T4 ou rT3 et en surveillant la production de T3, rT3, 3,3’-diiodothyronine et 3-monoiodothyronine par la chromatographie en phase liquide et la spectrométrie de masse en tandem (Butt et al., 2011).

Résultats équivoques – Antagoniste RA : Faible agent antiandrogène dans les cellules MDA-kb2 in vitro exposées à 10 et à 50 µM de la substance pendant 24 heures, suivi d'un essai sur le gène rapporteur de la luciférase (Christen et al., 2010). Li et al. (2010) et Hamers et al. (2006) n'ont observé aucun effet antiandrogène dans des cellules de levure (concentration non mentionnées) ni dans des ostéoblastes humaines à des concentrations de 10 µM à l'aide d'un essai AR-CALUX, respectivement, après l'administration de TBBPA. Aucun effet antiandrogène n'a été observé dans un gène rapporteur luciférase sous le contrôle d'un RA dans des cellules NIH3T3 à des concentrations allant de 1 x 10^-11 à 1 x 10^-9 M (Kitamura et al., 2005).

Résultats négatifs – Activité de l'aromatase : Le TBBPA n'a ni inhibé ni induit l'activité de l'aromatase (CYP19) et n'était pas cytotoxique à des concentrations de 2,5 µM et de 7,5 µM dans les cellules humaines de carcinomes corticosurrénaux H295R après une incubation de 24 heures (Cantón et al., 2005).

Immunotoxicité in vitro : Des cellules tueuses naturelles humaines ont été exposées à des concentrations de TBBPA allant jusqu'à 10 µM; la fonction lytique diminue à une concentration aussi faible que 0,5 µM après une exposition de 24 heures et à une concentration de 1,0 µM après une exposition d'une heure (Kibakaya et al., 2009).  Une étude de suivi a montré que l'expression des protéines de surface CD2, CD11a, CD16, CD18 nécessaires à l'attachement des cellules NK aux cellules cibles diminuait après l'exposition à 5 µM de TBBPA pendant 24 heures (Hurd et Whalen, 2011). Les cellules NK ont été exposées au TBBPA (0, 1, 2,5, 5 et 10 µM) pendant 24 h, 48 h et 6 jours, ou pendant 1 h, suivie de 24 h, 48 h et 6 jours sans TBBPA. Chaque expérience a eu lieu quatre fois à l'aide de cellules préparées à partir de donneurs de sang différents. L'expression des CD16 était diminuée de supérieur(e) à  35 %, celle des CD11a de 16 % et celle des CD18 et CD56 d'environ 20 %. L'expression des CD18 était également en baisse (14 %) à 2,5 µM. La viabilité des cellules était compromise à 10 µM de TBBPA (en permanence) et à 5 µM après 48 heures et sans évaluation. L'expression des protéines CD16 et CD56 était comparable au bout de 24 et de 48 heures à 2,5 µM (Hurd et Whalen, 2011).
Han et al. (2009)  ont indiqué que l'exposition au TBBPA (0 à 50 µM) induisait la transcription de la cyclo-oxygénase-2 et l'expression des cytokines pro-inflammatoires par la voie de signalisation P13-K/Akt/MAPK médiée par une augmentation de l'activation de NF-κB et de AP-1 dans les macrophages du murin in vitro.

L'exposition de granulocytes neutrophiles humains à des concentrations de TBBPA d'au moins 2 µM a entraîné une augmentation de la production d'espèces réactives de l'oxygène qui était fonction de la concentration (Reistad et al., 2005).
L'incubation de splénocytes de souris avec du TBBPA (3 µmol/L) a entraîné une diminution importante de l'expression de la chaîne α du récepteur de l'interleukine-2 (CD25), qui est un antigène nécessaire à la production des lymphocytes T pendant une réponse immunitaire (Pullen et al., 2003).

Le TBBPA n'a montré aucun effet cytotoxique sur les splénocytes ou sur les cellules dendritiques dérivées de la moelle osseuse (BMDC) chez les souris Nc/Nga à tendance atopique. Après une exposition au TBBPA, l'expression moléculaire de la surface des cellules et la production de cytokine a été mesurée à l'aide de l'étude WST-1, du système FACS et du test ELISA (trois cultures individuelles obtenues auprès de trois animaux, et deux ou trois expériences indépendantes ont été répétées). Les splénocytes ont été exposés à des concentrations de TBBPA comprises entre 0,01 et 10 µg/ml pendant 24 heures et les cellules de moelle osseuse ont été exposées à des concentrations de TBBPA comprises entre 0,001 et 1 µM pendant 6 jours; en outre, des cellules dentritiques dérivées de la moelle osseuse (BMDC) ont été collectées. Le TBBPA a accru l'expression des molécules HLA classe II et CD86, ainsi que du récepteur de l'antigène des lymphocytes T (TCR) dans les splénocytes (1 et 10 µg/ml) et a augmenté la production d'interleukine (IL)-4 (mais une tendance a été observée pour les répercussions). Il n'y a pas eu d'effet sur l'expression des molécules HLA classe II, CD80, CD86, CD11c et DEC205 et sur la production de chimiokine après 24 heures d'exposition au TBBPA dans les BMDC (Koike et al., 2012).

Immunotoxicité in vivo : L'exposition de souris à du TBBPA 1 % dans l'alimentation sur une période de 28 jours (1 887 mg/kg p.c. par jour) a permis de constater une diminution de l'immunité de l'hôte contre le virus respiratoire syncytial dans les poumons et le liquide de lavage bronchoalvéolaire, mais aucun effet sur l'immunité systémique à l'examen des échantillons de rate (Watanabe et al., 2010).

Hépatoxicité in vitro : Le TBBPA a complètement inhibé la fixation de la [³H]-rosiglitazone au PPARγ avec une concentration inhibitrice 50 % (CI₅₀) de 0,7 µM. Des cellules HeLa soumises à une transfection provisoire avec des plasmides (GALRE)5-βglobine-luciférase et pSG5-GAL4-PPARγ (chez l'humain et chez le dard-perche), ou (PPRE)3-TK-luciférase et pSG5-PPARγ (Xenopus laevis) ont été incubées avec 10 μM de TBBPA ou 1 μM de rosiglitazone (Rosi) afin d'évaluer leur potentiel agoniste PPARγ. Les affinités de fixation au PPARγ au cours d'essais de fixation avec la [³H]­rosiglitazone ont été mesurées (0,001 à 30 μM) et les conséquences du TBBPA sur la différenciation des adipocytes à l'aide des cellules NIH3T3-L1 ont été étudiées. À 10 μM, le TBBPA produisait également l'adipogénèse, alors que le cotraitement avec le CD5477 inhibait l'action adipogénique du TBBPA, ce qui indique que le TBBPA catalyse l'adipogénèse via le PPARγ (Riu et al., 2011).

Sinon, lorsqu'on a testé la capacité du TBBPA à activer le récepteur PXR de l'humain et de la souris à l'aide d'une étude de transfection, les résultats ont été négatifs (Siu et al., 2012). Les cellules HepG2 ont été soumises à une transfection avec le gène hPXR de pleine longueur, ainsi qu'avec le rapporteur CYP3A4-luc ou le gène mPXR de pleine longueur, en association avec le rapporteur (CYP3A2)3-luc et le plasmide témoin CMX-ß-galactosidase. Les cellules ont été traitées avec du DMSO (témoin) ou du TBBPA pendant 24 h à des concentrations de 0 à 20 µM.

Les concentrations dans le sérum sanguin variaient entre plus de 0,5 et 3,8 µg/kg de lipides chez différents groupes d'exposition professionnelle examinés dans le cadre de plusieurs études menées en Suède et en Norvège (RER UE, 2006). Les concentrations dans le lait maternel variaient entre 0,01 et 11 µg/kg de lipides dans un cas des îles Féroé (RER UE, 2006).

On a administré à cinq sujets humains une dose unique par voie orale de 0,1 mg/kg de TBBPA. Deux des principaux métabolites du TBBPA, soit le glucuronide (5 des 5 sujets) et le sulfate du TBBPA (2 des 5 sujets), ont été détectés dans les échantillons d'urine et de sang, alors que le TBBPA d'origine ne se trouvait dans aucun des échantillons de plasma humain à des concentrations détectables. Les pics de concentrations de glucuronide du TBBPA dans le plasma ont été atteints entre deux et six heures après l'administration de la substance, puis les métabolites ont été éliminés lentement dans l'urine, et la LD a été atteinte 124 heures après l'administration. Le sulfate du TBBPA (décelé chez 2 des 5 sujets humains) a été décelé entre quatre et six heures après l'administration, et sa concentration était inférieure à la LD dans l'urine. D'après les auteurs, le TBBPA présenterait une faible biodisponibilité systémique chez les humains en raison du métabolisme hépatique efficace ainsi que du rôle important de la circulation entérohépatique montré par l'élimination lente du glucorinide du TBBPA dans l'urine des humains et des rats (Schauer et al., 2006).